脑胶质瘤特异的生物标记物在神经胶质瘤的影响

　　脑胶质瘤是较常见的颅内原发性恶性肿瘤之一，占原发性脑肿瘤的50%。根据美国CNS注册肿瘤注册机构的统计，在原发性恶性脑瘤中，大约有70%是恶性胶质瘤，年发病率在5/10万左右，恶性胶质瘤5年不到10%。脑胶质瘤多为浸润生长，手术全切困难，术后放化疗效果不佳。所以早期诊断脑胶质瘤，评估疗效和判断预后的指标是重要的。

　　目前，脑胶质瘤特异的生物标记物在神经胶质瘤的诊断和治疗中起着重要作用，而特异的循环性生物标记在今后的治疗中起着重要作用。综述了脑胶质瘤循环生物标记物的研究现状。

　　1.循环肿瘤细胞(CTC)

　　CTC是一种从肿瘤脱落到循环系统的肿瘤细胞，对肿瘤特性有较强的反应，可以作为肿瘤的生物标记。Macarthur等研究了11例CTC患者，8例CTC检出CTC，其中5例CTC为CTC。CTC数量与患者放射治疗相关，因为放射治疗后CTC量急剧下降。另外一项研究中，在141名患者外周单核细胞中，使用胶质纤维酸性蛋白对CTC进行CTC鉴别，其中20%的患者被检出CTC，但部分患者10ml血液样本中只有一份CTC。CTC的数量限制了它的大规模临床应用，CTC评估胶质母细胞瘤细胞特性的准确性尚待确定。

　　2.胞外囊泡(extracellarvesicles,EVs)

　　EVs直接由血浆膜出芽分泌，内含多种肿瘤标记物的囊泡，可能含有肿瘤蛋白分子.无细胞核酸分子和微小核糖核酸(microRNA,miRNA)分子等。EVs能保护可溶性分子标记，防止降解。这些细胞分泌的囊泡可以在细胞之间进行长距离的信号传递来应对慢性或急性疾病。肿瘤细胞中，EVs可在微环境改变时迅速释放出较合适的肿瘤细胞标记。血液中EVs中含有物的半衰期很短，来自于肿瘤的EVs可以迅速反映细胞表型的变化。与脑胶质瘤治疗中EVs相关的研究仍处于起步阶段。

　　研究者们对22例脑胶质瘤患者进行免疫治疗期间EVs的研究发现免疫治疗后，在免疫治疗后，核外的信使核糖核酸，包括白介素-8.IgM-8转化生长因子-β和基质金属蛋白酶控制剂1水平，以及免疫反应具有明显的相关性。另外一项研究对7例神经胶质瘤患者(O6-methylguanine-DNAmethylguanine-DNAmethyltransferase，MGMT)和烷基嘌呤-DNA-N-糖基化酶(Alkylpurine-DNANglycosylase，本研究还发现，在EVs中，MGMT和APNG的水平与胶质瘤的治疗反应密切相关。

　　3.肿瘤相关蛋白质

　　蛋白是较常见的..应用较广的肿瘤标记物，如腺癌标记物腺特异抗原.结肠直肠癌标志物糖类抗原199.卵巢癌标志物糖类抗原125等。相对于CTC和循环肿瘤DNA(circulatingtumorDNA,ctDNA)，循环蛋白作为一种生物标记物的缺点是，其特异性较低。但是因其标本采集容易，检测费用低廉.容易进行动态监测，因此在临床中较广泛的应用。胶质母细胞瘤的血清蛋白组学研究目前还处于初级阶段。近年来，一些研究表明，趋化因子受体4,S100A8和S100A9可作为神经胶质瘤的一个潜在生物标记。还有一些学者通过质谱技术，获得了结合珠蛋白和甲状腺素运载蛋白两种特异蛋白质生物标记。EGFR突变(epidermalgrowthfactorreceptor,EGFR)是一种较为特异的胶质瘤蛋白，EGFRα突变可能是一种很有价值的靶向治疗生物标记物，如注射肽类疫苗，但EGFRα突变仍然没有被发现。

　　4.miRNA。

　　miRNA是非编码RNA分子(21~24个核苷酸)，对调节肿瘤细胞和正常细胞具有重要作用。其中，miRNA作为细胞内通信的主要组成部分，具有调节致癌性基因和抑癌基因的功能，在肿瘤的诊断及预后评价方面起着重要的作用。近年来，胶质母细胞瘤的miRNA亚型特征对于评估患者的生存期具有重要意义。一些学者在回顾性地研究了癌症基因组图谱资料，发现miR-130a和替莫唑胺对MGMT甲基化状态的反应之间存在明显的相关关系；miR-603是调节MGMT的另一因素。补充评价MGMT甲基化能力可能是治疗应答的评估指标，而miR-181d可以直接降低MGMT表达，血浆miR-181水平与患者对替莫唑胺的反应有关；miR-21是诊断胶质瘤较可靠的生物标记，在鉴别假性癌进展和放射性坏死方面具有重要价值。

　　虽然miRNA作为生物标记物尚需进一步证实和评价，但其独特的生物学特征更适于作为循环性标记。

　　5.ctDNA。

　　ctDNA是肿瘤DNA(继发灶)释放到血流中的DNA，从血浆中分离出的ctDNA可以反映肿瘤的突变部位。CTC和外泌体大小在150~200bp之间，是一种由细胞降解引起的细胞坏死或凋亡的肿瘤细胞。ctDNA的含量随肿瘤负荷及治疗反应而改变。在不同类型肿瘤中(包括神经胶质瘤)的ctDNA研究显示，ctDNA能反映原发性肿瘤或转移瘤基因变异或突变的特征。ctDNA是一个敏感的参量，预计在恶性细胞中会产生50×106的ctDNA。血浆中ctDNA的半衰期很短，其动态变化可以实时反映肿瘤的稳定状态。

　　当前，应用循环DNA片段分析可检出胶质瘤患者血浆中异柠檬酸脱氢酶1突变。临床上以MRI.B超.ECG.放射性同位素病理组织学检查为主，确诊以组织病理学检查为主，但仅限于组织学检查，无法进行动态监测。在影像学改变或临床症状之前，可以进行脑胶质瘤患者的循环性生物标记物的改变，而且取样方便.相对无创.方法简单，克服时空差异，实现动态监测；还可以用来评估疗效、预后、预警复发、评估疗效等。