胶质瘤是常见的病吗

　　胶质瘤是国际上常见的恶性肿瘤，也是癌症死亡的六大较常见原因。胶质瘤通常处于晚期诊断阶段，中国是神经胶质瘤的高危地区之一。胶质瘤患者的预后没有得到很好的好转。阐明神经胶质瘤发生发育过程中关键途径的详细相互作用和调节机制，为早期发现和诊断找出分子标记重要。环状RNA是一种不同的非编码RNA，具有共价环结构。

　　一circRNA它发现于20世纪70年代，至今被认为是转录的副产品，随着高通量测序的到来，各种各样的测序circRNAs在高稳定性和保护人类基因组中发现。circRNA可以作为竞争的内源RNA通过揩微RNA，调节基因表达。例如，hsa_circ_0001946通过影响信号传细胞的生长。在神经胶质瘤中，circ_0034642可通过靶向miR-1205促进细胞进程BATF3水平。

　　另一个出版物指出，hsa通过调著好转了神经胶质瘤的进展。关于circRNA对神经胶质瘤肿瘤发生发展作用的研究仍在进行中。circ_0079593是较近发现的与神经胶质瘤有关的circRNA，在circRNA上调芯片筛选的肿瘤组织circ_0079593映射到chr7。其基因符号为IGF2BP3、剪接长度为262bp。研究人员的目的是研究circ_0079593在不同神经胶质瘤细胞系中的表达及其在神经胶质瘤发生过程中的功能。

　　首先测量60对神经胶质瘤样品及相应的正常组织circ_0079593的表达谱。通过定量实时聚合酶链反应U118，U251，U87MG和LN229细胞系和正常人星形胶质细胞系NHA进一步分析其表达。为了观察circ_0079593在神经胶质瘤中的功能，通过细胞转染降低或提高其水平。还研究了circ_0079593的临床意义。评估细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡。还分析了这些监管措施背后的机制。circ_0079593可能是神经胶质瘤的新标志物和治疗目标。

　　从医院收集了60对新鲜冷冻的神经胶质瘤和正常组织。手术切除后的全部标本立即放置在-80°C保存下来。胶质瘤细胞和正常星形胶质细胞NHA均在Dulbecco改良的Eagle培养基或RoswellParkMemorialInstitute1640培养基中培养，其中胎牛血清10%，并保持在细胞培养箱中。通过TRIzol试剂分离总RNA。使用SYBRSelectMasterMix试剂盒通过qRT-PCR评估circRNA和miRNA甘油醛3-磷酸脱氢酶作为内标。

　　在96孔板中培养转染细胞，每孔2×10细胞。每天间隔将10微升细胞计数试剂盒8试剂供应到培养基中，再孵化2小时。然后通过酶标仪在450nm测量光密度值以估计细胞活力。用流细胞仪测量细胞凋亡。在悬浮于400μL的1x结合缓冲液后，细胞系使用膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素和碘化丙啶在黑暗中放置10分钟。荧光表达通过流式细胞仪检测。细胞迁移能力是通过伤口愈合测定来测试的。

　　将LN229和U251细胞系在2.5厘米的培养皿中用无血清培养基培养。之后，用无菌移液器吸头产生划痕。48小时后，拍摄每个孔的划痕并分析其面积。

　　细胞转移特性是通过使用具有8μm对孔的单元进行评估。将在完全培养基中培养的转染细胞添加到上层隔室。将有10%。FBS600微升完全培养基填充到匹配的下隔室中。繁殖24小时后，清除保留在上腔室的细胞。用低聚甲醛固定通过滤膜的迁移细胞，用结晶紫染色并拍照。WT或Mutcirc_0079593报告质粒mimics-NC共同转染。转染后36小时，荧光素酶活性通过荧光素酶报告试剂盒测量。

　　本研究的全部数据均通过GraphPadPrism5.01和SPSS22.0进行分析，表示为均值±SD。通过采用T检验或单因素方差分析进行比较。通过T检验或单因素方差分析。Fisher精确检验，Kaplan–Meier分析和Cox回归分析评价临床意义。

　　为了揭示circ_研究人员首先对0079593神经胶质瘤的功能进行了评估circ_神经胶质瘤组织中0079593的水平。CIRC_与相邻样品相比，0079593的表达。发现与NHA与全部注册细胞系相比，全部注册细胞系circ_0079593都有所增强。接下来，研究circ_神经胶质瘤患者0079593的临床价值。研究人员根据神经胶质瘤组织circ_0079593的平均值将患者分为两组。

　　高circ_0079593表达在患者中经常观察到的肿瘤大小较大、水平较高的肿瘤WHO。circ_0079593级神经胶质瘤患者生存率高circ_0079593高表达的神经胶质瘤患者较差。多变量分析显示circ_0079593作为独自的预后指标。上述结果表明，circ_0079593在神经胶质瘤中很重要circRNA不平衡，其升高可能与肿瘤的进展有关。将两种siRNA应用于敲除circ_0079593较高水平的LN229细胞系中circ_0079593的水平。

　　结果，击倒效率好。为了提高载体，研究人员还建立了载体circ_0079593在U251细胞株的表达。在U251细胞中，circ_0079593的表达明显增加了20倍。测量细胞增殖、凋亡和转移的特性circ_0079593的功能作用。CCK-8分析表明，沉默circ_0079593相对于转染si-NC的LN229细胞降低了细胞活力。circ_0079593的过表达促进了U251细胞的活力。

　　此外，在LN229和U在251细胞系中，细胞凋亡率和circ_0079593表达负相关。为了检测circ_0079593是否可能影响细胞转移特性，进行伤口愈合和Transwell实验。两个siRNA均敲低circ_0079593可以控制LN229细胞迁移。相反，表达过的circ_0079593增强了U细胞迁移潜能251。Transwell迁移分析显示了类似的结果。Transwell入侵实验表明，沉默circ_0079593显着损害LN229细胞入侵能力。相反，异位表达circ_0079593在U相反的效果是251细胞系。

　　荧光素酶报告基因检测表明，miR-182或miR-433的增加降低了野生载体的荧光素酶强度，但对突变载体没有影响，说明野生载体的荧光素酶强度降低。circ_0079593序列上的“UGCCAA”和“AUCAUGA”基序是针对circ_0079593的miR-182和miR-433的作用位点。

　　对LN229和U251细胞系进行了抢救实验circ_0079593的生物学作用是否取决于其对其的作用miR-182和miR-433的衰减。qRT-PCR结果表明沉默circ_0079593在LN229细胞好转miR-182和miR-433的表达。但这种增强可以在控制剂共转染组中得到挽救。异位表达的表达。circ_0079593控制了U251细胞系中的miR-182和miR-433水平。

　　同时，和circ_0079593载体和miR‐182或miR‐433模拟物共转染后，miR‐182和miR‐433水平分别恢复。而且，由circ_0

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