外泌体在脑胶质瘤诊断中研究进展

　　1脑胶质瘤诊断现状

　　脑胶质瘤的准确诊断和分级有助于确定脑胶质瘤的治疗方案及预后判断。目前，脑胶质瘤的诊断主要依靠影像学和组织病理学方法。

　　1.1神经影像学检查

　　影像学检查不仅能反映肿瘤的形态学改变，更能反映肿瘤的生物学特征。MRI是目前颅内占位的优选检查，可提供肿瘤形态学及良恶性诊断较可靠的依据。虽然CT、MRI、PET-CT等影像学诊断脑胶质瘤技术日益前沿，但仍然有假阳性，不够方便快捷等，不易普及。

　　1.2组织学诊断方法

　　是对肿瘤组织切片，然后在显微镜下观察其组织形态，是诊断脑胶质瘤的“金标准”。但是组织学诊断方法有局限性：首先，脑胶质瘤的组织形态类型繁多，不同观察者对组织学诊断也存在差异；其次，病理组织检测为侵入性检查，只能通过手术或者立体定向活检才能得到，受病人自身条件或者当地医学条件限制；较后，组织病理学分类不能判断预后，相同的组织病理其预后存在较大差异，也无法进一步划分肿瘤的亚型分类等。

　　2外泌体在脑胶质瘤诊断中的应用进展

　　2016年，WHO更新了脑胶质瘤的诊断标准，联合了组织学和分子学特征，包括与临床和影像学相关的组织学特点，有助于诊断、预后判断的相关生物学指标，并由基因分析做出的脑胶质瘤亚型分型。新的标准把基因分型和分子生物标志物纳入脑胶质瘤的诊断，表皮生长因子受体变体Ⅲ（epidermal growth factor receptor variantⅢ，EGFRVⅢ)、异柠檬酸脱氢酶1（isocitrate dehydrogenasel，IDH1）、miR-21被证实为胶质瘤的不同标志物。

　　新的诊断标准主要依据肿瘤生长方式、生物学行为、基因突变等，提高了脑胶质瘤的诊断及预后判断的准确性，为临床诊断脑胶质瘤提供了新的标准。目前，已证实为胶质瘤不同分子生物标志物并纳入胶质瘤较新诊断标准的标志物如下。

　　2.1EGFRvⅢ

　　EGFRvⅢ与胶质母细胞瘤具有高度特异性。EGFR基因外显子2~7缺失的病人占胶质母细胞瘤总数的20%~25%。Skog等从30例胶质母细胞瘤病人血清外泌体中检测到EGFRvⅢ，其中14例在匹配的组织样本中检测到EGFRvⅢ。这表明基于血清的生物标志物可能比组织样本更能灵敏地检测肿瘤特征。胶质母细胞瘤切除术后血清样本中不再含有EGFRvⅢ，表明EGFRvⅢ可以作为诊断胶质瘤的生物分子标志物。

　　2.2IDH1/2突变

　　IDH1/2是辅酶Ⅱ依赖的脱氢酶，催化异柠檬酸的氧化脱羧反应生成酮戊二酸。这些基因突变改变了IDH1和IDH2的酶活性。对比正常组织及胶质母细胞瘤，发现80%的低级别胶质瘤和约10%的胶质母细胞瘤中具有这种突变，但未在正常的大脑或身体组织检测到。在对胶质母细胞瘤组织使用单克隆抗体检测IDH1突变型，及使用高灵敏度的qRT-PCR或数字PCR技术对组织和脑脊液中外泌体来源的RNA及血液的DNA进行分析，发现对IDH1/2突变的鉴定不仅可以作为胶质瘤诊断的生物学标志物，还可以作为好转胶质母细胞瘤生存预后的标志物。

　　2.3miR-21

　　miRNA可通过部分互补序列沉默mRNA转录来帮助调节基因表达。鉴于miRNA比mRNA稳定以及能在外泌体中检测到，外泌体miR-NA已成为生物分子标志物的研究热点。miR-21是胶质母细胞瘤细胞中一种过表达的miRNA，在胶质母细胞瘤中介导多种重要的致癌功能，包括控制细胞凋亡、促进细胞增殖和耐药DNA表达等。Akers等从胶质母细胞瘤病人脑脊液的外泌体中分离到的miR-21比对照组高10倍，而手术切除后脑脊液外泌体中的miR-21水平下降了一个数量级。