人源肿瘤组织异种移植模型及复制的方法

　　人源肿瘤组织异种移植模型及复制的方法，人源肿瘤组织异种移植模型是指直接将手术切除患者的新鲜肿瘤组织或细胞、活检组织或细胞通过异位或者原位移植到免疫缺陷小鼠体内的一种异种移植模型，依赖于小鼠提供的环境。人源肿瘤组织异种移植的较大优点是模型保留原始肿瘤细胞的微环境，继承原发肿瘤的全部分子生物学特性，保留肿瘤的异质性。人源肿瘤组织异种移植对筛选抗肿瘤药物和评估患者疗效、吸收率及副作用等也很重要。

　　目前，人源肿瘤组织异种移植模型与临床研究的相关肿瘤较为接近，模型对肿瘤临床前期评估、治疗和预后具有重要的转化意义，有望为肿瘤患者个体化治疗带来新突破。大量研究表明，人源肿瘤组织异种移植模型具有高度保真度，可保留原发肿瘤的组织病理学、遗传特征及肿瘤异质。

　　人源肿瘤组织异种移植模型可采取原位移植肿瘤组织和异位移植肿瘤组织。①原位移植移植模型：将肿瘤组织因移植到原位，由于被移植部位与原始肿瘤所处的微环境差异小，原位移植被认为更具有移植优势。然而，这种类型的移植对操作技能、支出及观察肿瘤的方法有更高要求。②异位移植肿瘤模型：将肿瘤组织种植入到小鼠背部皮肤下或肾包膜下，该种方法不仅可以提高肿瘤形成率，而且可以缩短肿瘤形成时间，且操作较原位移植简单，观察和测量更为方便。用于复制人源肿瘤组织异种移植模型的小鼠根据免疫缺陷程度可以分为T淋巴细胞缺陷小鼠（BALB/C小鼠）、T淋巴细胞、B淋巴细胞双缺陷小鼠（SCID小鼠）、非肥胖糖尿病T淋巴细胞、B淋巴细胞双缺陷小鼠（NODSCID小鼠）、Ｔ淋巴细胞、Ｂ淋巴细胞及NK细胞缺陷小鼠（NSG小鼠、NOG小鼠）。其中，NSG小鼠是目前国际公认的具有较高免疫缺陷程度，且较适合人细胞或组织移植的小鼠。

　　胶质瘤人源肿瘤组织异种移植复制方法：①采用外科手术、组织及活检等方法，采集一部分脑胶质瘤的组织标本，将其余脑胶质瘤组织置于甲醛溶液中冷冻保存，待用分析；②将采集的脑胶质瘤组织标本行去除坏死组织等预处理后，用无菌手术刀将胶质瘤组织切成小块（1～3mm3）或将组织制备单细胞悬液；③将处理好的胶质瘤组织移植到免疫缺陷小鼠中，通常将肿瘤组织移植于小鼠背部皮下；④将荷鼠置于特定的无病原体环境中，饲养荷成瘤小鼠4～6个月。当肿瘤体积增加至1～2 cm3时处死小鼠，取出肿瘤并标记为F0；⑤重复上述步骤，将F0代肿瘤移植于其他免疫缺陷小鼠体内，复制F1代移植瘤小鼠，逐渐传代移植；⑥以此为模型，进行胶质瘤方面的研究，以便为患者确定较佳的治疗方案。

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