额外结构域与胶质瘤

　　1额外结构域在胶质瘤中表达丰富

　　由于额外结构域在胶质瘤血管中表达丰富的特异性，成为胶质瘤血管研究的焦点和热点。为明确额外结构域在脑肿瘤组织（包括胶质瘤）的分布特点，曾使用单抗BC-1、IST6和IST4分别特异性识别脑肿瘤中的B+FN（额外结构域表达阳性）、B-FN（额外结构域表达阴性）和各种FN，染色结果证实额外结构域主要存在于肿瘤和新生血管。由于胶质瘤细胞生成、增殖和迁移过程会不断产生额外结构域，理论上胶质瘤级别越高，肿瘤新生血管EDB含量就越高，因此，单抗BC-1可临床用于胶质瘤级别辅助诊断与肿瘤复发的评估。

　　2额外结构域抗体在胶质瘤诊断中的应用

　　2.1抗体BC-1的辅助诊断作用：抗体BC-1并非与额外结构域直接结合，而是特异识别额外结构域相邻的抗原表位。99mTc-BC-1判断胶质瘤瘤周生长效果好，肿瘤摄取99mTc-BC-1的量与额外结构域表达相关性更佳。利用99mTc-BC-1在胶质瘤富集的特点，评估胶质瘤血管生成、肿块体积等方面有价值，临床可为MRI、SPECT、PET等影像学补充肿瘤定位信息。

　　2.2 L19在胶质瘤诊断的作用：额外结构域抗体在高低级别胶质瘤鉴别诊断也有良好优势。L19是一种人工生产的单链重组抗体，利用L19与额外结构域特异结合的特点，L19推算的血管生成指数（angiogenic index，AI）和胶质瘤分级具有更好相关性。因具有非侵袭、与胶质瘤相关度高等特点，弥补临床胶质瘤组织活检易导致颅内出血风险等缺点，抗体L19在高低级别胶质瘤鉴别诊断应用前景良好。许多低级别星形细胞瘤（B-FN阴性）可能发展为间变性星形细胞瘤（B-FN阳性），临床通过放射性标记的L19进行免疫追踪，可判断胶质瘤恶性进展。

　　2.3Anticalins在胶质瘤诊断及鉴别诊断中的作用：Anticalins是一类人工重组的非免疫球蛋白结合蛋白，分为3种类型：N7A、N7E和N9B，可与EDB特异性结合。Anticalins具有良好的组织渗透性、可协调的血浆半衰期、稳定性好（耐受温度达70℃）、分子量小、易于制备等特点。Anticalins染色区主要集中于胶质母细胞瘤的血管周围，并特异表达在胶质母细胞瘤起源的内皮细胞，说明Anticalins在评估胶质瘤新生血管表达情况的合适性和准确性。可能与高级别胶质瘤血供更丰富、血管内皮分化程度更低等有关。临床毛细胞型星形细胞瘤和胶质母细胞瘤有时因高度相似的血管化、有丝分裂、组织坏死等特点难以区分，而Anticalins可作为诊断及鉴别胶质母细胞瘤的有力手段。

　　3额外结构域抗体在胶质瘤放疗中的应用

　　放射治疗是胶质瘤治疗的一个重要组成部分，应当精确、均匀给予肿瘤治疗剂量，尽量确定周围正常组织不受放射线损伤，减少并发症。但临床常因对肿瘤评估不充分，由于组织敏感程度不同等，使放疗达不到预期效果。为正确掌握放射物质体内生物学分布，克服局部区域有限的血供、组织间高压、抗体吸收等难题，以及评定放射剂量、提高放疗效果，同位素抗体标记正逐步受到青睐。因额外结构域抗体具有选择性识别的特性，成为肿瘤放射治疗的合适辅助工具。

　　3.1 L19在放疗的作用：根据制备技术不同，额外结构域抗体分类也不相同。L19是一种单链Fv抗体片段，与额外结构域具有亚纳摩尔单位的亲和力，可分为3类抗体：二聚体单链Fv（～50kDa）、小免疫蛋白（SIP，～80kDa）和免疫球蛋白G1（IgG1，～150kDa）。BERNDORFF等在鼠畸胎瘤实验中分别用131I和90Y同位素标记此3类抗体，发现131I标记的SIP放疗效果更好、更顺利。

　　采用放射性同位素治疗的胶质瘤病例放射性脑坏死发生率较高，并可出现头皮坏死、插植通道种植等并发症。反思目前胶质瘤放疗的上述弊端，抗体标记、生物分布剂量估算及毒副作用精确量化值得借鉴。结合放射性同位素的单克隆抗体，可特异性与肿瘤细胞内的相关抗原结合，通过放射性同位素衰变发出β射线或Auger电子，使染色体断裂而起靶向杀伤肿瘤细胞的作用。

　　SPAETH等利用131I标记的抗额外结构域抗体小分子免疫蛋白（L19）和正常组比较，评估放射免疫治疗（radio immunotherapy，RIP）对胶质瘤疗效，发现131I标记L19的RIP疗法，相对传统RIP在胶质瘤辅助治疗中，有更好应用前景。可能与L19分子稳定性好，特异性靶向识别新生血管，肿瘤区放射药物浓度高，副作用小等特点紧密相关。

　　3.2BsAb在放疗的作用：额外结构域双特异性抗体（AP39xm679，bsMAb）比小分子免疫蛋白（L19）在放射疗法治疗胶质瘤方面更具有优势。BsAb可通过将效应细胞转向胶质瘤细胞，以非MHC限制的方式增强肿瘤杀伤。此外，BsAb不仅在治疗剂和靶标之间提供合适连接，而且可同时阻断肿瘤发生的双重信号通路，因其具有稳定性好，表达量高，溶解度高，在肿瘤组织潴留时间更长，血浆清除率更快等特点，逐渐走进科研工作者的视野。

　　4额外结构域抗体在胶质瘤化疗中的应用

　　由于额外结构域在新生血管内皮细胞和胶质瘤细胞特异表达，因此，成为化疗研究新热点。GU等设计与额外结构域具有纳米级亲和力的APTEDB，能靶向锚定胶质瘤细胞和新生血管，具有控制胶质瘤血管生成和杀灭肿瘤细胞的双重效果，细胞APTEDB内化程度越高，抗增殖能力越强，且没有明显毒性作用，克服以往化疗药物的高陪化率等问题，为胶质瘤化疗提供新思路。但APTEDB在胶质瘤异质性，血-脑脊液屏障开放，化疗耐药性的产生和联合用药的效果等方面知之甚少，值得深入研究。

　　5额外结构域抗体与分子靶向药物在胶质瘤治疗中的应用

　　分子靶向药物治疗胶质瘤是未来达到临床治愈目标的可行方案之一。IL-2、TNF-α等细胞因子与胶质瘤增殖、侵袭等密切相关，靶向药物的研发将好转胶质瘤治疗现状。由L19组成的分子靶向药具有抗瘤效果，且无明显毒副作用。目前无有此类靶向药治疗胶质瘤的报道，一是胶质瘤复杂的生物学行为和体内内环境变化易影响靶向药物发挥作用。二是当代生物科学技术未能开发完善的药物投递系统。三是目前临床研究的疗效评价标准可能并不完全适用于分子靶向药物。但额外结构域抗体与细胞因子联合作用的新思路无疑为胶质瘤治疗带来新曙光。