自然杀伤T细胞与胶质瘤免疫治疗

　　1 自然杀伤T细胞介导着胶质瘤肿瘤监测

　　肿瘤浸润性自然杀伤T细胞的数量与病人的预后呈正相关，处于肿瘤微环境中的自然杀伤T细胞，其数量及功能会发生明显变化。因此，自然杀伤T细胞数量及其功能状态是评价免疫作用中较重要的指标因素。在小鼠中，腺癌、髓母细胞瘤和神经母细胞瘤等肿瘤模型的研究表明自然杀伤T细胞介导着肿瘤监测。在人类中，患有不同类型癌症的病人皆表现循环自然杀伤T细胞数量的减少，自然杀伤T细胞的增殖和细胞因子表达降低。研究显示，GBM病人的循环自然杀伤T细胞数量与对照组的数量相当，在负载α-半乳糖酰基鞘氨醇的成熟自体树突状细胞（dendritic cells，DC）存在的情况下，来自GBM病人的自然杀伤T细胞同样能够进行体外扩增，并且杀死胶质瘤靶细胞。

　　2 自然杀伤T细胞通过识别CD1d直接杀伤脑胶质瘤细胞

　　自然杀伤T细胞可通过直接识别细胞表达的CD1d，介导脑胶质瘤细胞的裂解。现已证实，成人高级别和低级别胶质瘤的肿瘤细胞表面表达CD1d。GBM病人的自然杀伤T细胞进行体外扩增，且以CD1d依赖的方式直接裂解脑胶质瘤细胞。髓母细胞瘤是另一种细胞表面表达CD1d的高度恶性脑胶质细胞瘤，能够合适地被α-半乳糖酰基鞘氨醇激活的自然杀伤T细胞杀死。在人髓母细胞瘤NOS/SCID小鼠动物模型实验中，在肿瘤部位注射自然杀伤T细胞后，可延长小鼠的存活周期。目前，尚不清楚的是自然杀伤T细胞浸润到胶质瘤肿瘤微环境的程度。此外，自然杀伤T细胞在脑胶质瘤病人体内的作用尚待确定。

　　3 自然杀伤T细胞通过调节免疫细胞间接杀伤脑胶质瘤细胞

　　自然杀伤T细胞可通过分泌细胞因子调节其他免疫细胞的募集和功能，间接发挥抗胶质瘤作用。研究显示，当胶质瘤的CD1d表达下调时，表达CD1d的抗原递呈细胞（antigen presenting cells，APCs）通过交叉提呈方式激活自然杀伤T细胞，后者激活NK细胞间接发挥抗胶质瘤作用。此外，自然杀伤T细胞还可以通过肿瘤微环境中的细胞因子，进行非抗原依赖性激活，例如自然杀伤T细胞可以招募或激活其他效应细胞如T细胞、B细胞、NK细胞以及DC细胞。

　　GBM临床模型中，在α-半乳糖酰基鞘氨醇脉冲照射下，促进T细胞的分化发育为自然杀伤T细胞，CD1d激活自然杀伤T细胞，活化的自然杀伤T细胞越多，荷瘤小鼠的存活率越高；该模型还表明，整个肿瘤细胞用α-半乳糖酰基鞘氨醇脉冲照射后，能够在体外激活自然杀伤T细胞并诱导T细胞反应；而且，抗原呈递细胞可高水平表达CD1d，DC细胞合适地将α-半乳糖酰基鞘氨醇呈递给自然杀伤T细胞，并增强先天和适应性免疫应答。目前已有评估性实验证实，α-半乳糖酰基鞘氨醇可作为DC细胞疫苗免疫疗法治疗乳腺癌和黑色素瘤的佐剂。

　　DC细胞是APC细胞中较合适的细胞，通过负载肿瘤裂解物，进行疫苗免疫治疗测试。虽然部分DC细胞疫苗仅能在有限的程度内对GBM显示出合适性，但是通过联合递送α-半乳糖酰基鞘氨醇负载的DC细胞和肿瘤抗原进行免疫仍是抗脑胶质瘤免疫治疗的合适途径。

　　4 自然杀伤T细胞增强免疫效应降低胶质瘤生长率

　　自然杀伤T细胞通过增强免疫应答来调节免疫效应。较近研究报道了一种合适的基于自然杀伤T细胞的免疫治疗脑胶质瘤的方法：通过使用外泌体，将肿瘤细胞分泌的小泡作为抗原，将DC细胞疫苗中的α-半乳糖酰基鞘氨醇与肿瘤来源的外源体共同输注到原位GBM的大鼠模型中，通过增加抗原特异性细胞毒性T淋巴细胞（cytotoxic lymphocyte，CTL）反应和降低抗原特异性CTL反应，降低胶质瘤生长率，增强免疫调节效应。

　　5 自然杀伤T细胞调节胶质瘤微环境发挥免疫控制作用

　　自然杀伤T细胞可以通过改变脑胶质瘤肿瘤微环境中的免疫控制发挥作用。胶质瘤的肿瘤耐受性取决于肿瘤细胞局部产生细胞因子以及肿瘤微环境中免疫控制细胞募集的细胞因子。研究报道自然杀伤T细胞能够在脑胶质瘤移植模型的免疫耐受过程中发挥作用。

　　尽管自然杀伤T细胞在肿瘤耐受中的具体作用机制尚不清楚，但脑胶质瘤病人的肿瘤组织中存在免疫耐受性的IL-10+IL-6+自然杀伤T细胞，并且发现胶质瘤细胞分泌的微RNA92a在这些调节性自然杀伤T细胞的生殖中起重要作用。此外，IL-10和IL-6在维持脑胶质瘤免疫控制微环境中起重要作用。IL-10+IL-6+自然杀伤T细胞在体外与神经胶质瘤细胞共培养诱导后，其细胞因子IFN-γ、穿孔素和FasL表达降低，并控制CD8+T细胞增殖。