脑肿瘤起始细胞是什么？

　　胶质母细胞瘤是人类较恶性的脑瘤类型，每年在德国诊断约3000起事件。即使在较高水平的护理和采用新的治疗策略的情况下，胶质母细胞瘤患者中位生存期仍小于20个月，但在过去十年中，生存时间略有好转。需要开发新的治疗策略。胶质母细胞瘤高水平恶性肿瘤是其特征性行为的结果，包括免疫控制、高水平抗辐射、大多数化疗药物和低氧。

　　此外，肿瘤表现出广泛的新血管生成，侵入性地生长到健康的脑组织中，使得不可能完全切除。脑肿瘤起始细胞，又称神经胶质瘤干细胞样细胞，是一种神经胶质瘤干细胞样细胞。胶质母细胞瘤细胞的强抗性亚群被认为是肿瘤开始和复发的原因。用于治疗胶质母细胞瘤替莫唑胺是标准化疗药物胶质母细胞瘤细胞脱离更多干细胞的表型。

　　参与这一过程是信号级联有丝分裂原激活蛋白激酶的方式，这是在信号级联有丝分裂原激活蛋白激酶的过程中胶质母细胞瘤细胞组成活化。这些方法的下游底物是Y盒组合蛋白1，显示了两者的转录和翻译活性。在许多瘤种中，YB-表达与恶性和进步有关。

　　细胞应激，如辐射或化疗诱导的DNA损伤引起的细胞压力诱导翻译后的几种细胞压力YB-1装饰，包括磷酸化、乙酰化或SUMOylation。这些修改建议宣传核易位。随后，核YB-1激活多药耐药蛋白的表达，是抗肿瘤治疗的经典介体。

　　YB-1.参与治疗性腺病毒的复制。的YB-依赖性溶瘤腺病毒XVir-N-31个研究小组，也被称为Ad-Delo3-RGD显影，复制在肿瘤细胞中携带重要YB-1。在携带R在28个细胞源性神经胶质瘤小鼠中，肿瘤内注射XVir-N-31可延长存活率。在约60％的BTIC中，YB-1.主要位于细胞核中，这与这些细胞的良好病毒复制和病毒介导的裂解有关。

　　在约40％的BTIC中，YB-只有少量表达，主要位于细胞质中，使病毒复制减少100-1000倍。建立癌细胞系的照射导致癌细胞系的照射YB-1的易位到细胞核。尚未确定在BTIC是否也会发生这种情况。

　　本研究评估了与治疗相关的辐射剂量是否在体外和体外BTIC小鼠神经胶质瘤模型诱导YB-1易位进入细胞核，促进细胞核的进入XVir-N-31复制及后续BTIC溶瘤。与放射治疗和基础XVir-N-结合肿瘤病毒治疗的临床相关治疗策略。

　　BTICR11，R28和R49细胞系由C.Beier提供博士友谊，如前面提到的原发性胶质母细胞瘤患者获得并维持在干细胞许可培养基中的肿瘤球，补充人体重组表皮生长因子、人体重组碱性成纤维细胞生长因子、人体白血病控制因子和2%B27补充剂用于保留肿瘤的原始分子特征，较大限度地减少分化。R28通过用Lenti-mCherry转导R然后选择嘌呤霉素生成28细胞BTIC。

　　在感染复数5下，用编码荧光蛋白mCherry预制慢病毒颗粒感染4×10细胞。感染后24小时，将培养基改为新鲜生长培养基。感染48小时后，加入嘌呤霉素。使用ZeissAxioImagerZ1荧光显微镜，以×50放大倍数监测选定的存活细胞mCherry荧光。

　　对于腺病毒感染，胰蛋白酶会被消化BTIC球分为单个细胞。在GammacellGC40设备中对BTIC和含有R28肿瘤球瘤球的脑切片。

　　在癫痫患者的手术过程中，获得了健康皮层区域的组织。根据之前的公开计划组织制备。为了确定组织的完整性，将组织小心的显微切割转移到冷的人工脑脊液中，并立即运送到实验室。组织总是沉浸在凉爽和碳化中aCSF中。除软外，组织块垂直修剪成皮革表面，250-350μ使用MICROMHM650V振动切片机制备了米厚片。

　　切片皮质组织后，将切片切成几块大小均匀的片。然后，将切片转移到未涂布的30mmMillicell-CM组织培养插入物培养膜上的毛孔，并保持在6孔培养皿中。对于长期培养，将板保存在与非肿瘤患者分离的人身上CSF中的37℃，5％CO2、全切湿度下。神经元在37℃下用NeuO。除去含NuO的CSF，加入新鲜的CSF。

　　为了计算组织切片中的细胞总量，根据制造商的规定，使用DAPI染色细胞核。使用ZeissAxioImagerZ以显微镜放大倍数为50倍的荧光显微镜获得Z堆栈。使用ImageJ软件对核计数。为了将BTIC在植入组织切片中，使用了20到50个细胞R28球。使用10次显微观察手动执行注入μ提升液管的。

　　补充重组中的切片和球体bFGF和EGF的人CSF中生长23天。每三天更改一次CSF。如果肿瘤区域达到可检测区域的边界，则定量使用较高可测量值。

　　制备、纯化和滴定XVir-N-31.使用具有绿色荧光蛋白的腺病毒来确定R11，R28和R49BTIC由于转导效率，腺病毒具有与之相同的转导效率XVir-N-31相同的RGD-基序修饰的外壳。通过在生长培养基中加入适量的病毒进行感染。

　　感染48小时后，细胞通过胰蛋白酶处理分离成单个细胞，并通过流分析GFP表达Summit软件在CyanADP分析流式细胞仪。优化了每个体外实验的使用。XVir-N-31的BTIC的MOI。上述感染。72小时后，整理细胞和培养基，制备冻融裂解物。Adeno-Rapid-X-Titration在293细胞中确定这些裂解物的病毒滴度。

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