氯离子通道蛋白-3在胶质瘤发生发展中的作用

　　氯离子通道蛋白-3在胶质瘤发生发展中的作用。

　　1、氯离子通道蛋白-3在胶质瘤增殖、迁移和凋亡中的作用

　　胶质瘤的病理分级越高，肿瘤细胞的增殖和迁移能力越强，肿瘤周围组织的水肿越明显。氯离子是细胞内外液中较重要的阴离子，被认为是参与调节性细胞体积回缩(regulatoryvolumedrease、RVD)过程中的主要溶质。许多细胞发现细胞膨胀会激活氯离子通道。

　　氯离子通道蛋白-3作为电压依赖性氯离子通道家族的重要成员之一，介导了细胞调节体积的变化，与细胞增殖、分化、凋亡等细胞周期事件有关。氯离子通道蛋白-3在胃癌组织和细胞系中表现较高。氯离子通道蛋白-3的高表现与胃癌患者不良的临床病理参数和较短的总生存时间有关；体外沉默氯离子通道蛋白-3可以降低胃癌细胞的增殖、迁移和入侵能力，其过度表达可以促进胃癌细胞的增殖、迁移和入侵能力。

　　氯离子通道蛋白-3在乳腺癌组织中的表现增加，通过沉默C-3可以控制增殖细胞核抗原Ki-67。细胞周期蛋白D1和细胞周期蛋白E的表现；表明沉默C-3可以控制细胞增殖和肿瘤生长。二氢青蒿素在鼻咽癌中的选择性抗肿瘤活性可能是通过特异性激活氯离子通道蛋白-3，导致CLC-外排，减少凋亡体积，进而导致Ca2+的积累和Caspase-3的活化，较终诱导细胞凋亡；这表明氯离子通道蛋白-3在二氢青蒿素的抗肿瘤活性中起着至关重要的上游作用。细胞增殖与细胞体积的变化密切相关。在中枢神经系统中，氯离子通道蛋白-3在调节胶质瘤细胞体积方面也起着重要作用。

　　Habela等研究发现，在胶质瘤细胞中敲除氯离子通道蛋白-3不仅会降低有丝分裂期的CL-电流，还会减慢有丝分裂前的凝集过程，防止染色质凝集，从而影响细胞增殖。Hubbi等研究发现，在肿瘤的入侵和迁移过程中，细胞形态的变化是促进细胞迁移的基本条件。氯离子通道蛋白-3介导的CL-和水的流出，实现细胞体积和形态的适当变化，促进胶质瘤细胞侵入紧凑曲折的细胞外间隙。同时，胶质瘤细胞的迁移也与细胞中Ca2+浓度的变化密切相关。

　　Montana等研究发现，缓激肽释放素通过缓激肽b2受体增加细胞中Ca2+的浓度，诱导细胞沿脑血管组织迁移。在表达氯离子通道蛋白-3的胶质瘤细胞中，控制钙/钙调素依赖性蛋白激酶II(calcium/calmodulin-depentproteinkinaseIIII、CaMKII)和直接控制氯离子通道蛋白-3也可以减少胶质瘤的入侵；作为一个分子链，CaMKII将细胞中钙的变化转化为细胞运动所需的氯离子通道蛋白-3电导的变化；这表明氯离子通道蛋白-3可以被CaMKII激活。然而，去除氯离子通道蛋白-3可以减少CaMKIIII介导的Ca2+活化氯离子在胶质瘤细胞中的电流，减少缓激肽释放素诱导的人胶质瘤细胞的迁移。

　　2、氯离子通道蛋白-3在胶质瘤免疫逃逸中的作用

　　本课题组初步研究发现，氯离子通道蛋白-3在胶质瘤细胞中表现较高，表现水平与肿瘤病理分级呈正相关，与预后呈负相关。氯离子通道蛋白-3不仅介导CL-外流，还被动调节细胞本身的体积和形态，以适应肿瘤周低渗水肿的环境和有限的空间；基质金属蛋白酶(matrixmetalloproteinase、MMP)等MMP-3.MMP-9等MMP表达也可以通过调节核因子-3.MMP-9的活性来增加，调节肿瘤细胞外环境，促进胶质瘤细胞的入侵和迁移。

　　根据陈列平教授的团队研究，肿瘤浸润淋巴细胞(Tumor-infiltratinglymphocytes、TILs)在肿瘤微环境中识别肿瘤相关抗原时，会释放出γ-干扰素(Interferon-γ、IFN-γ)、脂多糖(Lipopolysacharides、LPS)等炎症介质；这些炎症介质可以诱导肿瘤细胞表面PD-L1过度表达，从而发挥负免疫调节，避免T细胞的杀伤。IFN-γ属于炎症介质，NF-LB是一个关键的转录因子，涉及炎症和抗凋亡。IFN-γ诱导PD-L1的表达依赖于NF-LB。NF-LB可以在乳腺癌、肺癌、黑色素瘤等多项研究中调节PD-L1的表达。PD-L1作为肿瘤免疫逃逸的重要分子，当肿瘤细胞PD-L1过度表达并与T细胞表面受体PD-1相作用时，可以负调节免疫反应。

　　Wintterle等研究发现，PD-L1mRNA和蛋白质表达在12株胶质瘤细胞中，PD-L1表达在所研究的胶质瘤组织标本中较强；然而，PD-L1在正常脑组织中并不明显。还有研究表明，胶质瘤组织高表达PD-L1，与肿瘤病理分级和患者预后密切相关；PD-L1与PD-1的结合可以促进T淋巴细胞在肿瘤中的凋亡。氯离子通道蛋白-3介导的CL-流出可以降低细胞内CL-浓度，从而促进NF-LB的活化。

　　在P-糖蛋白依赖性肺腺癌细胞系中，氯离子通道蛋白-3表达可以通过NF-LB信号通路诱导癌细胞产生多种耐药性。这些研究结果表明，氯离子通道蛋白-3可能在PD-L1介导的胶质瘤免疫逃逸中发挥重要作用。