外分泌在脑胶质瘤研究中的作用

　　1提高脑胶质瘤细胞的凋亡能力

　　癌细胞分泌的外泌体，不仅可以通过肿瘤细胞表面抗原，诱导机体产生抗肿瘤免疫反应，也可以诱导机体产生免疫耐受、免疫抑制、转移促瘤生长蛋白和核酸等，从而促进肿瘤的发生和发展。WELTON等在对脑胶质瘤细胞进行研究时发现，从肿瘤细胞上清液中分离出的特定蛋白质和遗传物质能被邻近正常细胞吸收，并且能表达促血管新生蛋白，促进肿瘤生长和侵袭，导致肿瘤免疫逃逸。另外还有研究发现：正常表达PTEN的肿瘤细胞在脑定植后，其PTEN表达下降，从脑部分离出来后，PTEN表达水平将回到先前的水平。

　　深入研究发现：肿瘤细胞转移到大脑后，可由外泌体转化成胶质细胞，由外分泌体携带的miRNA-19a可靶向肿瘤细胞中PTENmRNA从而影响PTEN蛋白在肿瘤细胞中的表达水平，并通过影响CCL2、NF-κB等信号途径，促进肿瘤细胞的增殖，提高肿瘤细胞抗凋亡的能力；神经胶质细胞通过上述机制诱导，使肿瘤细胞适应和改造局部微环境，它为肿瘤的转移定植和形成转移灶提供了环境基础，从而促进脑转移。在研究像COSTA-SILVA这样的胰腺癌来源的外泌体时，也已经得到了证实。

　　2有利于术前诊断和判断预后

　　外分泌蛋白、miRNA等物质可以反映出分泌细胞的生理、病理和功能状态。由于脑脊液广泛分布于脑组织周围，是采集外泌体的重要来源。2012年，STREET等方法采集腹主动脉瘤患者的脑脊液，并取其外泌体，因当时需要大量脑脊液，限制了其发展。通过对外泌体的深入研究和对分离方法的改进，现在仅需10ml的脑脊液就可以进行相关蛋白组学和核酸定量检测。另外，外泌体检测具有非侵入性、稳定性、敏感性高等优点，使脑胶质瘤的外泌体研究取得了显著的进展。

　　2014年MANTEROLA等收集了30例诊断为恶性胶质母细胞瘤患者和30例正常对照组的血清外泌体。通过基因芯片技术筛选到了miR-574-3P、miR-320和RNU6-1基因，另外，单用RNU6-1或与多种miRNA结合可特异性诊断恶性胶质母细胞瘤。同时也证实，在血清和脑脊液外泌体中发现的肿瘤特异性RNA可以作为神经肿瘤的生物标志，预测疾病的进展和预后。此外，由非肿瘤细胞分泌的血管内皮细胞，如间充质干细胞，将成为脑肿瘤诊断和监测预后的新手段。

　　3靶向药物载体治疗

　　由于CNS解剖的特殊性和复杂性，传统药物难以渗透血脑脊液屏障，不能有效到达脑组织。它是一种能自由穿过血—脑脊液屏障的脂质小囊泡，是人体自身产生的，它可以逃避宿主免疫系统，并有可能成为治疗中枢神经系统疾病的新方法。目前针对外泌体治疗疾病有两种应用：①利用基因工程技术调节外泌体携带基因的表达。②采用物理方法将药物直接导入外泌体。ALVAREZ-ERVITI等通过静脉注射携带siRNA基因的外泌体来抑制小鼠脑组织相应的基因表达。

　　ZHUANG等将姜黄素载入外泌体，经鼻腔注射治疗自身免疫性脑炎动物模型，结果表明，嗅球能快速地被小胶质细胞吸收，从而起到抗炎作用；但对照组的单纯姜黄素和单纯的外泌体给药效果不显著。YANG等利用脑内皮细胞外泌体对斑马鱼的肿瘤模型进行抗肿瘤治疗，也证实了外泌体能够顺利地通过血-脑脊液屏障发挥抗肿瘤作用。所以，外泌体可以作为一种理想的新型给药载体，通过静脉、鞘内腔、鼻腔等途径进行治疗。应用凋亡细胞外泌体携带高滴度抗原，目前正在对复发性恶性胶质瘤进行Ⅰ期临床试验。